چکیده
کشت سلول این امکان را فراهم می¬آورد تا تغییرات و آثار آسیب سلولی در محیط کنترل شده مورد بررسی قرار گیرند. در این مطالعه که در سال 1396 انجام شد امکان تهيه كشت سلول اوليه از باله و کلیه ماهی سفید دریای خزر(Rutilus kutum) به دو روش کاشتن(Explant) با دو تيمار (تيمار با آنزيم و بدون آنزيم تريپسين) و جداسازی آنزیمی با دو تيمار(استفاده و بدون استفاده از همزن مغناطيسي) مورد بررسی قرار گرفت. بدین منظور پس از طی مراحل شستشو و ضدعفونی، سلول ها در محیط کشت L-15 حاوی20 درصد سرم جنین گوساله و آنتی بیوتیک در فلاسک های کشت سلول cm2 25 کاشته شدند. در روش آنزیمی با استفاده از همزن قطعات بافت با ظرفی حاوی تریپسین بر روی استیرر قرار گرفته ولی در روش بدون همزن قطعات بافت بر روی استیرر قرار نمیگرد، در انتها در هر دو روش بافت ها سانتریفیوژ شده و در فلاسک های کشت سلول کاشته می¬شوند. سپس بعد از گذشت 7 الی 10 روز زمانی که سلول ها 70 درصد کف فلاسک را پوشاندند در هر دو روش اقدام به پاساژ سلول ها گردید، سلول ها توسط 3 سی سی آنزیم تریپسین از کف فلاسک جدا شدند و پلیت سلولی حاصل به فلاسک کشت جدید منتقل شد. در مقایسه کلی بین روش های تولید کشت اولیه، روش جداسازی آنزیمی توسط آنزیم تریپسین با استفاده از همزن مغناطیسی موفق تر بود و نتايج نشان داد شرايط بهينه براي كشت اوليه سلولهاي باله و کلیه ماهي سفيد محیط کشت L-15 به همراه 20 درصد سرم جنین گوساله، pH ، 2/7 و دمای 24 درجه¬ی سانتی گراد مي باشد. تا کنون 12پاساژ از سلول هاي باله ماهي سفيد انجام شده و سلول ها از رشد خوبی نیز برخوردار هستند. با توجه به تکثیر و پاساژ مناسب سلول های بدست آمده می¬توان از این کشت سلولی برای تحقیقات ویروس شناسی، سم شناسی و ایمنی شناسی استفاده کرد، اما سلول های کلیه علی رغم مهاجرت سلول 37/88 درصد، تا 5 پاساژ تکثیر شدند و پس از آن تکثیر مناسبی صورت نگرفت.